Satu Dunia Satu Pertarungan
─ Kerjasama internasional untuk membangun komunitas global takdir yang merespons tantangan pandemi Covid-19
Novel Coronavirus yang menyapu di seluruh dunia telah menghasilkan krisis pandemi Covid-19 global yang sedang berlangsung. Novel Coronavirus tidak memiliki perbatasan, tidak ada negara yang akan terhindar dari pertempuran ini melawan Covid-19. Menanggapi pandemi Covid-19 di seluruh dunia ini, Liming Bio-Products Corp memberikan kontribusi untuk mendukung kesejahteraan komunitas global kami.
Dunia kita saat ini dihadapkan dengan dampak yang belum pernah terjadi sebelumnya dari novel Coronavirus Disease 2019 (Covid-19) pandemi. Sampai saat ini, tidak ada obat yang efisien yang tersedia untuk pengobatan penyakit ini. Namun, banyak tes diagnostik telah dikembangkan untuk mendeteksi COVID-19. Tes ini didasarkan pada metode molekuler atau serologis untuk mendeteksi asam nukleat spesifik coronavirus atau biomarker antibodi. Karena Covid-19 telah mencapai status pandemi, diagnosis dini infeksi coronavirus baru sangat penting dalam menilai penyebaran virus dan mengandungnya, tetapi tes sempurna untuk penggunaan universal belum ada. Kita harus tahu tes apa yang berpotensi digunakan untuk skrining, diagnosis, dan pemantauan infeksi COVID-19, dan apa keterbatasannya. Sangat penting bagaimana memanfaatkan alat ilmiah ini dengan lebih baik dan untuk membantu mengidentifikasi dan mengendalikan kemunculan penyakit yang menyebar dengan cepat dan serius ini.
Tujuan dari deteksi coronavirus baru adalah untuk menentukan apakah seseorang yang memiliki infeksi COVID-19 atau pembawa asimptotik yang dapat menyebarkan virus secara diam-diam, untuk memberikan informasi penting untuk memandu pengambilan keputusan untuk perawatan klinis. Studi sebelumnya telah menunjukkan bahwa 70% keputusan klinis tergantung pada hasil pengujian. Ketika metode deteksi yang berbeda digunakan, persyaratan kit reagen deteksi juga berbeda.
Gambar 1
Gambar1:Diagram yang menunjukkan tahap-tahap kunci tingkat biomarker umum selama perjalanan waktu khas infeksi COVID-19. Sumbu x menunjukkan jumlah hari infeksi, dan sumbu y menunjukkan virus load, konsentrasi antigen, dan konsentrasi antibodi dalam periode yang berbeda. Antibodi mengacu pada antibodi IgM dan IgG. Baik RT-PCR dan deteksi antigen digunakan untuk mendeteksi ada atau tidak adanya coronavirus baru, yang merupakan bukti langsung untuk deteksi pasien awal. Dalam seminggu setelah infeksi virus, deteksi PCR, atau deteksi antigen lebih disukai. Setelah infeksi coronavirus baru selama sekitar 7 hari, antibodi IgM terhadap novel coronavirus secara bertahap meningkat dalam darah pasien, tetapi durasi keberadaannya pendek, dan konsentrasinya berkurang dengan cepat. Sebaliknya, antibodi IgG terhadap virus muncul kemudian, biasanya sekitar 14 hari setelah infeksi virus. Konsentrasi IgG secara bertahap meningkat, dan bertahan lama dalam darah. Dengan demikian, jika IgM terdeteksi dalam darah pasien, itu berarti bahwa virus baru -baru ini terinfeksi, yang merupakan penanda infeksi awal. Ketika antibodi IgG terdeteksi dalam darah pasien, itu berarti bahwa infeksi virus telah terjadi selama beberapa waktu. Ini juga disebut infeksi terlambat atau infeksi sebelumnya. Ini sering terlihat pada pasien yang berada dalam fase pemulihan.
Biomarker coronavirus baru
Coronavirus baru adalah virus RNA, yang terdiri dari protein dan asam nukleat. Virus menyerang tubuh inang (manusia), memasuki sel melalui situs pengikatan ACE2 yang sesuai, dan bereplikasi dalam sel inang, menyebabkan sistem kekebalan manusia merespons penjajah asing dan menghasilkan antibodi spesifik. Oleh karena itu, asam nukleat vial dan antigen, dan antibodi spesifik terhadap coronavirus baru secara teoritis dapat digunakan sebagai biomarker spesifik untuk mendeteksi coronavirus baru. Untuk deteksi asam nukleat, teknologi RT-PCR adalah yang paling umum digunakan, sedangkan metode serologis umumnya digunakan untuk mendeteksi antibodi spesifik coronavirus baru. Saat ini, ada berbagai metode pengujian yang dapat kami pilih untuk menguji infeksi COVID-19 [1].
Prinsip Dasar Metode Uji Utama Untuk Coronavirus Baru
Banyak tes diagnostik untuk COVID_19 tersedia sejauh ini, dengan lebih banyak kit tes menerima persetujuan berdasarkan otorisasi penggunaan darurat setiap hari. Meskipun perkembangan uji baru yang keluar dengan begitu banyak nama dan format yang berbeda, semua tes COVID_19 saat ini pada dasarnya bergantung pada dua teknologi utama: deteksi asam nukleat untuk RNA virus dan immunoassay serologis yang mendeteksi antibodi spesifik virus (IgM dan IgG).
01. Deteksi Asam Nukleat
Reaksi rantai transkripsi-polimerase terbalik (RT-PCR), amplifikasi isotermal yang dimediasi loop (LAMP), dan sekuensing generasi berikutnya (NGS) adalah metode asam nukleat yang umum untuk mendeteksi RNA coronavirus baru. RT-PCR adalah jenis tes pertama untuk COVID-19, yang direkomendasikan oleh Organisasi Kesehatan Dunia (WHO) dan Pusat Pengendalian dan Pencegahan Penyakit AS (CDC).
02. Deteksi Antibodi Serologi
Antibodi adalah protein pelindung yang diproduksi dalam tubuh manusia sebagai respons terhadap infeksi virus. IgM adalah tipe awal antibodi sedangkan IgG adalah antibodi tipe yang lebih baru. Sampel serum atau plasma biasanya diperiksa untuk keberadaan IgM dan IgG spesifik jenis antibodi untuk penilaian fase akut dan pemulihan infeksi COVID-19. Metode deteksi berbasis antibodi ini termasuk uji imunokromatografi emas koloid, lateks atau imunokromatografi mikrosfer fluoresen, uji imunosorben terkait enzim (ELISA), dan uji chemiluminescence.
03. Deteksi Antigen Viral
Antigen adalah struktur pada virus yang diakui oleh tubuh manusia yang memicu sistem pertahanan kekebalan tubuh untuk menghasilkan antibodi untuk membersihkan virus dari darah dan jaringan. Antigen virus yang ada pada virus dapat ditargetkan dan terdeteksi dengan menggunakan immunoassay. Seperti RNA virus, antigen virus juga ada di saluran pernapasan orang yang terinfeksi dan dapat digunakan untuk mendiagnosis fase akut infeksi COVID-19. Oleh karena itu, sering direkomendasikan untuk mengumpulkan spesimen pernapasan atas seperti air liur, swab nasofaring, dan orofaring, batuk dalam, cairan lavage bronchoalveolar (BALF) untuk pengujian antigen awal.
Memilih metode pengujian untuk coronavirus baru
Memilih metode pengujian melibatkan banyak faktor, termasuk pengaturan klinis, pengujian kontrol kualitas, waktu penyelesaian, biaya pengujian, metode pengumpulan pengambilan sampel, persyaratan teknis personel laboratorium, persyaratan fasilitas dan peralatan. Deteksi asam nukleat atau antigen virus adalah untuk memberikan bukti langsung tentang keberadaan virus dan mengkonfirmasi diagnosis infeksi coronavirus baru. Meskipun ada banyak metode untuk deteksi antigen, sensitivitas deteksi mereka dari coronavirus baru secara teoritis lebih rendah daripada amplifikasi RT-PCR. Pengujian antibodi adalah deteksi antibodi anti-virus yang diproduksi dalam tubuh manusia, yang tertinggal dalam waktu dan seringkali tidak dapat digunakan untuk deteksi dini selama fase akut infeksi virus. Pengaturan klinis untuk aplikasi deteksi dapat bervariasi, dan situs pengumpulan sampel juga mungkin berbeda. Untuk mendeteksi asam dan antigen nukleat virus, spesimen perlu dikumpulkan di saluran pernapasan di mana virus hadir, seperti usap nasofaring, swab orofaring, sputum, atau cairan lavage bronchoalveolar (BALF). Untuk deteksi berbasis antibodi, spesimen darah perlu dikumpulkan dan diperiksa untuk adanya antibodi anti-virus spesifik (IgM/IgG). Namun, hasil uji antibodi dan asam nukleat dapat saling melengkapi. Sebagai contoh, ketika hasil pengujian adalah asam nukleat-negatif, IgM negatif tetapi IgG-positif, hasil ini menunjukkan bahwa pasien saat ini tidak membawa virus, tetapi telah pulih dari infeksi coronavirus baru. [2]
Keuntungan dan Kerugian Tes Coronavirus Baru
Dalam protokol diagnosis dan pengobatan untuk coronavirus pneumonia baru (Trial Version7) (dirilis oleh National Health Commission & Administrasi Negara Bagian Tradisional Tiongkok pada 3 Maret 2020), pengujian asam nukleat digunakan sebagai metode standar emas untuk diagnosis novel tersebut Infeksi coronavirus, sementara pengujian antibodi juga dianggap sebagai salah satu metode konfirmasi untuk diagnosis.
Temuan patogen dan serologis
(1) Temuan patogen: Asam nukleat coronavirus baru dapat dideteksi pada usap nasofaring, dahak, sekresi saluran pernapasan bawah, darah, tinja dan spesimen lain menggunakan metode RT-PCRAND/atau NGS. Lebih akurat jika spesimen diperoleh dari saluran pernapasan bawah (sputum atau ekstraksi saluran udara). Spesimen harus diserahkan untuk pengujian sesegera mungkin setelah pengumpulan.
(2) Temuan serologis: IgM spesifik virus NCP menjadi terdeteksi sekitar 3-5 hari setelah onset; IgG mencapai titrasi setidaknya peningkatan 4 kali lipat selama pemulihan dibandingkan dengan fase akut.
Namun, pemilihan metode pengujian tergantung pada lokasi geografis, peraturan medis, dan pengaturan klinis. Di AS, NIH mengeluarkan pedoman pengobatan Coronavirus Disease 2019 (COVID-19) (situs diperbarui: 21 April 2020) dan FDA mengeluarkan kebijakan untuk tes diagnostik untuk penyakit coronavirus-2019 selama darurat kesehatan masyarakat (dikeluarkan pada 16 Maret.2020 ), di mana pengujian serologis antibodi IgM/IgG yang dipilih hanya sebagai tes penyaringan.
Metode Deteksi Asam Nukleat
RT_PCR adalah uji asam nukleat yang sangat sensitif yang dirancang untuk mendeteksi apakah coronavirus RNA baru hadir atau tidak ada dalam pernapasan atau spesimen lainnya. Hasil tes PCR positif berarti keberadaan coronavirus RNA baru dalam sampel untuk mengkonfirmasi infeksi COVID-19. Hasil tes PCR negatif tidak berarti tidak adanya infeksi virus karena dapat dipengaruhi oleh kualitas sampel yang buruk atau titik waktu penyakit pada fase yang dipulihkan, dll. Meskipun RT-PCR adalah tes yang sangat sensitif, ia memiliki beberapa kelemahan. Tes RT-PCR dapat bersifat padat karya dan memakan waktu, sangat tergantung pada kualitas tinggi sampel. Ini bisa menjadi tantangan karena jumlah RNA virus tidak hanya sangat bervariasi antara pasien yang berbeda tetapi juga dapat bervariasi dalam pasien yang sama tergantung pada titik waktu ketika sampel dikumpulkan serta fase infeksi atau timbulnya gejala klinis. Mendeteksi novel coronavirus membutuhkan spesimen berkualitas tinggi yang mengandung cukup banyak RNA virus utuh.
Tes RT-PCR dapat memberikan hasil negatif yang salah (negatif palsu) untuk beberapa pasien yang memiliki infeksi COVID-19. Seperti yang kita ketahui, situs infeksi utama coronavirus baru terletak di paru -paru dan saluran pernapasan bawah, seperti alveoli dan bronkus. Oleh karena itu, spesimen dahak dari batuk dalam atau cairan lavage bronchoalveolar (BALF) yang dianggap memiliki sensitivitas tertinggi untuk deteksi virus. Namun, dalam praktik klinis, sampel sering dikumpulkan dari saluran pernapasan atas dengan menggunakan swab nasofaring atau orofaring. Mengumpulkan spesimen ini tidak hanya tidak nyaman bagi pasien tetapi juga membutuhkan personel yang terlatih secara khusus. Untuk membuat pengambilan sampel kurang invasif atau lebih mudah, dalam beberapa kasus pasien dapat diberikan swab oral dan memungkinkan mereka untuk mengambil sampel dari mukosa bukal atau lidah yang menyapu diri mereka sendiri. Tanpa RNA virus yang cukup, RT-qPCR dapat mengembalikan hasil tes negatif palsu. Di Provinsi Hubei, Cina, sensitivitas RT-PCR dalam deteksi awal dilaporkan hanya sekitar 30%-50%, dengan rata-rata 40%. Tingginya tingkat false negative kemungkinan besar disebabkan oleh pengambilan sampel yang tidak memadai.
Selain itu, tes RT-PCR membutuhkan personel yang sangat terlatih untuk melakukan langkah-langkah ekstraksi RNA yang kompleks dan prosedur amplifikasi PCR. Ini juga membutuhkan tingkat perlindungan biosafety yang lebih tinggi, fasilitas laboratorium khusus, dan instrumen PCR real-time. Di Cina, tes RT-PCR untuk deteksi COVID-19 perlu dilakukan di laboratorium level 2 level 2 (BSL-2), dengan perlindungan personel menggunakan praktik biosafety level 3 (BSL-3). Di bawah persyaratan ini, dari awal Januari hingga awal Februari 2020, kapasitas laboratorium CDC China Wuhan hanya dapat mendeteksi beberapa ratus kasus per hari. Biasanya, ini tidak akan menjadi masalah saat menguji penyakit menular lainnya. Namun, ketika berhadapan dengan pandemi global seperti COVID-19 dengan jutaan orang yang berpotensi diuji, RT-PCR menjadi masalah kritis karena persyaratannya untuk fasilitas laboratorium khusus atau peralatan teknis. Kerugian ini dapat membatasi RT-PCR untuk digunakan sebagai alat yang efisien untuk penyaringan, dan juga dapat menyebabkan keterlambatan dalam laporan hasil pengujian.
Metode deteksi antibodi serologis
Dengan kemajuan perjalanan penyakit, terutama pada tahap tengah dan akhir, tingkat deteksi antibodi sangat tinggi. Sebuah studi di Rumah Sakit Wuhan Tengah South menunjukkan bahwa tingkat deteksi antibodi dapat mencapai lebih dari 90% pada minggu ketiga infeksi COVID-19. Juga, antibodi adalah produk dari respons imun manusia terhadap coronavirus novel. Tes antibodi menawarkan beberapa keunggulan dibandingkan RT-PCR. Pertama, antibodi serologis menguji sederhana dan cepat. Tes aliran lateral antibodi dapat digunakan untuk point-of-care untuk memberikan hasil dalam 15 menit. Kedua, target yang terdeteksi oleh tes serologis adalah antibodi, yang diketahui jauh lebih stabil daripada RNA virus. Selama pengumpulan, transportasi, penyimpanan dan pengujian, spesimen untuk uji antibodi umumnya lebih stabil daripada spesimen untuk RT-PCR. Ketiga, karena antibodi didistribusikan secara merata dalam sirkulasi darah, ada lebih sedikit variasi pengambilan sampel dibandingkan dengan uji asam nukleat. Volume sampel yang diperlukan untuk uji antibodi relatif kecil. Misalnya, 10 mikroliter darah jari-empuk sudah cukup untuk digunakan dalam tes aliran lateral antibodi.
Secara umum, uji antibodi dipilih sebagai alat suplemen untuk deteksi asam nukleat untuk meningkatkan tingkat deteksi coronavirus baru selama kursus penyakit. Ketika tes antibodi digunakan bersama dengan uji asam nukleat, itu dapat meningkatkan akurasi uji untuk diagnosis COVID19 dengan mengurangi hasil positif palsu dan false negatif. Panduan operasi saat ini tidak merekomendasikan menggunakan dua jenis uji secara terpisah sebagai format deteksi independen tetapi harus digunakan sebagai format gabungan. [2]
Gambar2:Interpretasi yang benar dari asam nukleat dan uji antibodi hasil untuk mendeteksi infeksi coronavirus baru
Gambar 3:Liming Bio-Products Co., Ltd.-Novel Coronavirus IgM/IgG Antibody Dual Rapid Test Kit (StrongStep®SARS-COV-2 IgM/IgG Antibody Rapid Test, lateks imunokromatografi)
Gambar 4:Liming Bio-Products Co., Ltd.-StrongStep®Novel Coronavirus (SARS-COV-2) Multiplex Real-Time PCR Kit (Deteksi untuk Tiga Gen, Metode Probe Fluorescent).
Catatan:Kit PCR yang sangat sensitif dan siap digunakan ini tersedia dalam format yang diliofilisasi (proses pengeringan beku) untuk penyimpanan jangka panjang. Kit dapat diangkut dan disimpan pada suhu kamar dan stabil selama satu tahun. Setiap tabung premix berisi semua reagen yang diperlukan untuk amplifikasi PCR, termasuk reverse-transcriptase, Taq polimerase, primer, probe, dan substrat DNTPS. Pengguna dapat dengan mudah menyusun kembali campuran dengan menambahkan air pcr-grade bersama dengan templat dan memuat dengan mudah ke instrumen PCR untuk menjalankan amplifikasi.
Menanggapi wabah coronavirus baru, Liming Bio-Products Co., Ltd. telah bekerja dengan cepat untuk mengembangkan dua kit diagnostik untuk memungkinkan laboratorium kesehatan klinis dan masyarakat untuk dengan cepat mendiagnosis infeksi COVID-19. Kit ini sangat cocok untuk digunakan untuk skrining skala besar di negara dan daerah di mana wabah coronavirus baru menyebar dengan cepat, dan untuk memberikan diagnosis dan konfirmasi untuk infeksi COVID-19. Kit-kit ini hanya digunakan di bawah otorisasi penggunaan darurat pra-notifikasi (PEUA). Pengujian terbatas pada laboratorium yang disertifikasi berdasarkan peraturan otoritas nasional atau lokal.
Metode Deteksi Antigen
1. Deteksi antigen virus diklasifikasikan dalam kategori deteksi langsung yang sama dengan deteksi asam nukleat. Metode deteksi langsung ini mencari bukti patogen virus dalam spesimen dan dapat digunakan untuk diagnosis konfirmasi. Namun, pengembangan kit deteksi antigen membutuhkan kualitas tinggi antibodi monoklonal dengan afinitas yang kuat dan sensitivitas tinggi yang mampu mengenali dan menangkap virus patogen. Biasanya dibutuhkan lebih dari enam bulan untuk memilih dan mengoptimalkan antibodi monoklonal yang cocok untuk digunakan dalam persiapan kit deteksi antigen.
2. Saat ini, reagen untuk mendeteksi langsung coronavirus baru masih dalam tahap penelitian dan pengembangan. Oleh karena itu, tidak ada kit deteksi antigen yang divalidasi secara klinis dan tersedia secara komersial. Meskipun sebelumnya dilaporkan bahwa perusahaan diagnostik di Shenzhen telah mengembangkan kit deteksi antigen dan diuji secara klinis di Spanyol, keandalan dan akurasi pengujian tidak dapat divalidasi karena adanya masalah kualitas reagen. Sampai saat ini, NMPA (mantan China FDA) belum menyetujui kit deteksi antigen untuk penggunaan klinis. Sebagai kesimpulan, berbagai metode deteksi telah dikembangkan. Setiap metode memiliki kelebihan dan keterbatasan. Hasil dari berbagai metode dapat digunakan untuk verifikasi dan komplemen.
3. Memproduksi kit uji COVID-19 berkualitas sangat tergantung pada optimasi selama penelitian dan pengembangan. Liming Bio-Product Co., Ltd. Kit uji diperlukan untuk memenuhi standar manufaktur dan kontrol kualitas yang ketat untuk memastikan bahwa mereka memberikan tingkat kinerja dan konsistensi tertinggi. Para ilmuwan di Liming Bio-Product Co., Ltd. memiliki pengalaman lebih dari dua puluh tahun dalam merancang, menguji, dan mengoptimalkan kit diagnostik in vitro untuk memastikan tingkat kinerja tertinggi dalam kuantifikasi analitik.
Selama pandemi Covid-19, pemerintah Cina menghadapi lonjakan permintaan besar untuk bahan pencegahan epidemi di hotspot internasional. Pada tanggal 5 April, pada konferensi pers Dewan Negara Dewan Pencegahan dan Mekanisme Kontrol "memperkuat manajemen kualitas bahan medis dan mengatur urutan pasar", Jiang Fan, seorang inspektur tingkat pertama dari Departemen Perdagangan Luar Negeri dari Kementerian dari Commerce, mengatakan, "Selanjutnya, kami akan memfokuskan upaya kami pada dua aspek, pertama, untuk mempercepat dukungan dari lebih banyak pasokan medis yang dibutuhkan oleh komunitas internasional, dan juga, untuk meningkatkan kontrol kualitas, regulasi, dan manajemen produk. Kami akan memberikan kontribusi China untuk bersama -sama menanggapi epidemi global dan membangun komunitas dengan masa depan bersama untuk umat manusia.
Gambar 5:Liming Bio-Products Co., Novel Ltd. Novel Coronavirus Reagent telah memperoleh sertifikat pendaftaran Uni Eropa
Sertifikat Kehormatan
Houshenshan
Gambar 6. Liming Bio-Products Co., Ltd. Mendukung Rumah Sakit Gunung Wuhan Vulcan (Houshenshan) untuk melawan epidemi Covid-19 dan dianugerahi sertifikat kehormatan Palang Merah Wuhan. Rumah Sakit Gunung Wuhan Vulcan adalah rumah sakit paling terkenal di Cina yang berspesialisasi dalam perawatan Covid - 19 pasien yang parah.
Ketika wabah Coronavirus baru terus menyebar di seluruh dunia, Nanjing Liming Bio-Products Co., Ltd. melangkah untuk mendukung dan membantu masyarakat di seluruh dunia dengan teknologi inovatif kami untuk melawan ancaman global yang belum pernah terjadi sebelumnya ini. Pengujian cepat infeksi COVID-19 adalah bagian penting dari mengatasi ancaman ini. Kami terus berkontribusi dengan cara yang signifikan dengan menyediakan platform diagnostik berkualitas tinggi ke tangan para pekerja perawatan kesehatan garis depan sehingga orang dapat menerima hasil pengujian kritis yang mereka butuhkan. Upaya Liming Bio-Products Co., Ltd. dalam pertempuran melawan pandemi Covid-19 adalah untuk menyumbangkan teknologi, pengalaman, dan keahlian kami bagi komunitas internasional untuk pembangunan komunitas Global Destiny.
Long Press ~ Pindai dan Ikuti Kami
E-mail: sales@limingbio.com
Situs web: https://limingbio.com
Waktu posting: Mei-01-2020
