Satu dunia satu pertarungan
Kerja sama internasional untuk membangun komunitas global senasib sepenanggungan menanggapi tantangan pandemi COVID-19
Virus corona baru yang melanda seluruh dunia telah mengakibatkan krisis pandemi global COVID-19 yang sedang berlangsung.Novel coronavirus tidak memiliki batas, tidak ada negara yang akan terhindar dari pertempuran melawan COVID-19 ini.Menanggapi pandemi COVID-19 di seluruh dunia ini, Liming Bio-Products Corp memberikan kontribusi untuk mendukung kesejahteraan komunitas global kita.
Dunia kita saat ini dihadapkan pada dampak yang belum pernah terjadi sebelumnya dari pandemi penyakit virus corona baru 2019 (COVID-19).Sampai saat ini, tidak ada obat yang efisien yang tersedia untuk pengobatan penyakit ini.Namun, banyak tes diagnostik telah dikembangkan untuk mendeteksi COVID-19.Tes ini didasarkan pada metode molekuler atau serologis untuk mendeteksi asam nukleat spesifik virus corona baru atau biomarker antibodi.Karena COVID-19 telah mencapai status pandemi, diagnosis dini infeksi virus corona baru sangat penting dalam menilai penyebaran virus dan mengendalikannya, tetapi tes yang sempurna untuk penggunaan universal belum ada.Kita harus tahu tes apa yang berpotensi digunakan untuk skrining, diagnosis, dan pemantauan infeksi COVID-19, dan apa batasannya.Sangat penting bagaimana memanfaatkan alat-alat ilmiah ini dengan lebih baik dan untuk membantu mengidentifikasi dan mengendalikan munculnya penyakit yang menyebar dengan cepat dan serius ini.
Tujuan dari deteksi novel coronavirus adalah untuk menentukan apakah seseorang yang terinfeksi COVID-19 atau pembawa asimtotik yang dapat menyebarkan virus secara diam-diam, untuk memberikan informasi penting untuk memandu pengambilan keputusan untuk perawatan klinis.Penelitian sebelumnya telah menunjukkan bahwa 70% keputusan klinis bergantung pada hasil pengujian.Ketika metode deteksi yang berbeda digunakan, persyaratan kit reagen deteksi juga berbeda.
Gambar 1
Gambar 1:Diagram yang menunjukkan tahapan kunci tingkat biomarker umum selama perjalanan waktu khas infeksi COVID-19.Sumbu X menunjukkan jumlah hari infeksi, dan sumbu Y menunjukkan viral load, konsentrasi antigen, dan konsentrasi antibodi pada periode yang berbeda.Antibodi mengacu pada antibodi IgM dan IgG.Baik RT-PCR maupun deteksi antigen digunakan untuk mendeteksi ada tidaknya virus corona baru, yang merupakan bukti langsung untuk deteksi dini pasien.Dalam seminggu infeksi virus, deteksi PCR, atau deteksi antigen lebih disukai.Setelah infeksi novel coronavirus selama sekitar 7 hari, antibodi IgM terhadap novel coronavirus secara bertahap meningkat dalam darah pasien, tetapi durasi keberadaannya singkat, dan konsentrasinya menurun dengan cepat.Sebaliknya, antibodi IgG terhadap virus muncul kemudian, biasanya sekitar 14 hari setelah infeksi virus.Konsentrasi IgG secara bertahap meningkat, dan bertahan lama dalam darah.Jadi, jika IgM terdeteksi dalam darah pasien, itu berarti virus baru saja terinfeksi, yang merupakan penanda awal infeksi.Ketika antibodi IgG terdeteksi dalam darah pasien, itu berarti infeksi virus telah berlangsung selama beberapa waktu.Ini juga disebut infeksi akhir atau infeksi sebelumnya.Hal ini sering terlihat pada pasien yang berada dalam fase pemulihan.
Biomarker virus corona baru
Novel coronavirus adalah virus RNA, yang terdiri dari protein dan asam nukleat.Virus menyerang tubuh inang (manusia), memasuki sel melalui situs pengikatan reseptor ACE2 yang sesuai, dan bereplikasi di sel inang, menyebabkan sistem kekebalan manusia merespons penyerang asing dan menghasilkan antibodi spesifik.Oleh karena itu, asam nukleat botol dan antigen, serta antibodi spesifik terhadap novel coronavirus secara teoritis dapat digunakan sebagai biomarker spesifik untuk mendeteksi virus corona baru.Untuk deteksi asam nukleat, teknologi RT-PCR adalah yang paling umum digunakan, sedangkan metode serologis biasanya digunakan untuk mendeteksi antibodi spesifik virus corona baru.Saat ini tersedia berbagai metode pengujian yang dapat kita pilih untuk pengujian infeksi COVID-19 [1].
Prinsip dasar metode pengujian utama untuk virus corona baru
Banyak tes diagnostik untuk COVID_19 yang tersedia sejauh ini, dengan lebih banyak alat tes yang menerima persetujuan berdasarkan otorisasi penggunaan darurat setiap hari.Meskipun pengembangan tes baru keluar dengan begitu banyak nama dan format yang berbeda, semua tes COVID_19 saat ini pada dasarnya mengandalkan dua teknologi utama: deteksi asam nukleat untuk RNA virus dan immunoassay serologis yang mendeteksi antibodi spesifik virus (IgM dan IgG).
01. Deteksi asam nukleat
Reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR), loop-mediated isothermal amplification (LAMP), dan next-generation sequencing (NGS) adalah metode asam nukleat umum untuk mendeteksi RNA virus corona baru.RT-PCR adalah jenis tes pertama untuk COVID-19, yang direkomendasikan oleh Organisasi Kesehatan Dunia (WHO) dan Pusat Pengendalian dan Pencegahan Penyakit AS (CDC).
02.Deteksi antibodi serologis
Antibodi adalah protein pelindung yang diproduksi dalam tubuh manusia sebagai respons terhadap infeksi virus.IgM adalah jenis antibodi awal sedangkan IgG adalah antibodi jenis selanjutnya.Sampel serum atau plasma biasanya diperiksa untuk keberadaan jenis antibodi IgM dan IgG spesifik untuk penilaian fase akut dan pemulihan infeksi COVID-19.Metode deteksi berbasis antibodi ini termasuk uji imunokromatografi emas koloid, imunokromatografi mikrosfer lateks atau fluoresen, uji imunosorben terkait-enzim (ELISA), dan uji chemiluminescence.
03.Deteksi antigen virus
Antigen adalah struktur pada virus yang dikenali oleh tubuh manusia yang memicu sistem pertahanan kekebalan untuk menghasilkan antibodi untuk membersihkan virus dari darah dan jaringan.Antigen virus yang ada pada virus dapat ditargetkan dan dideteksi dengan menggunakan immunoassay.Seperti RNA virus, antigen virus juga ada di saluran pernapasan individu yang terinfeksi dan dapat digunakan untuk mendiagnosis fase akut infeksi COVID-19.Oleh karena itu, sering direkomendasikan untuk mengumpulkan spesimen saluran pernapasan atas seperti saliva, swab nasofaring dan orofaringeal, sputum batuk dalam, cairan bronchoalveolar lavage (BALF) untuk pengujian antigen awal.
Memilih metode pengujian untuk virus corona baru
Memilih metode pengujian melibatkan banyak faktor, termasuk pengaturan klinis, kontrol kualitas pengujian, waktu penyelesaian, biaya pengujian, metode pengumpulan sampel, persyaratan teknis personel laboratorium, persyaratan fasilitas dan peralatan.Deteksi asam nukleat atau antigen virus adalah untuk memberikan bukti langsung keberadaan virus dan mengkonfirmasi diagnosis infeksi virus corona baru.Meskipun ada banyak metode untuk deteksi antigen, sensitivitas deteksi mereka terhadap virus corona baru secara teoritis lebih rendah daripada amplifikasi RT-PCR.Tes antibodi adalah deteksi antibodi anti-virus yang diproduksi dalam tubuh manusia, yang terlambat dalam waktu dan sering tidak dapat digunakan untuk deteksi dini selama fase akut infeksi virus.Pengaturan klinis untuk aplikasi deteksi dapat bervariasi, dan tempat pengumpulan sampel juga mungkin berbeda.Untuk mendeteksi asam nukleat virus dan antigen, spesimen perlu dikumpulkan di saluran pernapasan di mana virus berada, seperti usap nasofaring, usap orofaringeal, sputum, atau cairan lavage bronchoalveolar (BALF).Untuk deteksi berbasis antibodi, spesimen darah perlu dikumpulkan dan diperiksa keberadaan antibodi anti-virus spesifik (IgM/IgG).Namun, hasil tes antibodi dan asam nukleat dapat saling melengkapi.Misalnya, ketika hasil pengujian adalah asam nukleat-negatif, IgM-negatif tetapi IgG-positif, hasil ini menunjukkan bahwa pasien saat ini tidak membawa virus, tetapi telah pulih dari infeksi virus corona baru.[2]
Keuntungan dan kerugian dari tes coronavirus baru
Dalam Protokol Diagnosis dan Perawatan untuk Novel Coronavirus Pneumonia (Versi Percobaan7) (Dirilis oleh Komisi Kesehatan Nasional & Administrasi Negara Pengobatan Tradisional Tiongkok pada 3 Maret 2020), pengujian asam nukleat digunakan sebagai metode standar emas untuk diagnosis novel infeksi coronavirus, sedangkan tes antibodi juga dianggap sebagai salah satu metode konfirmasi untuk diagnosis.
Temuan patogen dan serologis
(1) Temuan patogen: Asam nukleat virus corona baru dapat dideteksi pada swab nasofaring, dahak, sekret saluran pernapasan bawah, darah, feses, dan spesimen lain menggunakan metode RT-PCR dan/atau NGS.Lebih akurat jika spesimen diperoleh dari saluran pernapasan bagian bawah (ekstraksi dahak atau saluran udara).Spesimen harus diserahkan untuk pengujian sesegera mungkin setelah pengumpulan.
(2) Temuan serologis: IgM spesifik virus NCP menjadi terdeteksi sekitar 3-5 hari setelah onset;IgG mencapai titrasi setidaknya meningkat 4 kali lipat selama pemulihan dibandingkan dengan fase akut.
Namun, pemilihan metode pengujian tergantung pada lokasi geografis, peraturan medis, dan pengaturan klinis.Di AS, NIH mengeluarkan Pedoman Perawatan Penyakit Coronavirus 2019 (COVID-19) (Diperbarui Situs: 21 April 2020 ) dan FDA mengeluarkan Kebijakan untuk Tes Diagnostik untuk Penyakit Coronavirus-2019 selama Darurat Kesehatan Masyarakat (dikeluarkan pada 16 Maret 2020 ), di mana pengujian serologis antibodi IgM/IgG dipilih hanya sebagai tes skrining.
Metode Deteksi Asam Nukleat
RT_PCR adalah tes asam nukleat yang sangat sensitif yang dirancang untuk mendeteksi ada atau tidaknya RNA virus corona baru dalam spesimen pernapasan atau spesimen lain.Hasil tes PCR positif berarti adanya RNA coronavirus baru dalam sampel untuk mengkonfirmasi infeksi COVID-19.Hasil tes PCR negatif tidak berarti tidak adanya infeksi virus karena dapat dipengaruhi oleh kualitas sampel yang buruk atau titik waktu penyakit pada fase pemulihan, dll.Meskipun RT-PCR adalah tes yang sangat sensitif, ia memiliki beberapa kelemahan.Tes RT-PCR dapat menjadi padat karya dan memakan waktu, sangat bergantung pada kualitas sampel yang tinggi.Ini bisa menjadi tantangan karena jumlah RNA virus tidak hanya sangat bervariasi antara pasien yang berbeda tetapi juga dapat bervariasi dalam pasien yang sama tergantung pada titik waktu ketika sampel dikumpulkan serta fase infeksi atau timbulnya gejala klinis.Mendeteksi virus corona baru membutuhkan spesimen berkualitas tinggi yang mengandung jumlah RNA virus utuh yang cukup.
Tes RT-PCR dapat memberikan hasil negatif yang salah (negatif palsu) untuk beberapa pasien yang terinfeksi COVID-19.Seperti yang kita ketahui, tempat infeksi utama novel coronavirus terletak di paru-paru dan saluran pernapasan bagian bawah, seperti alveoli dan bronkus.Oleh karena itu, spesimen dahak dari batuk dalam atau cairan lavage bronchoalveolar (BALF) dianggap memiliki sensitivitas tertinggi untuk deteksi virus.Namun, dalam praktik klinis, sampel sering diambil dari saluran pernapasan bagian atas dengan menggunakan swab nasofaring atau orofaringeal.Pengumpulan spesimen ini tidak hanya membuat pasien tidak nyaman, tetapi juga membutuhkan personel yang terlatih khusus.Untuk membuat pengambilan sampel kurang invasif atau lebih mudah, dalam beberapa kasus pasien dapat diberikan swab oral dan memungkinkan mereka untuk mengambil sampel dari mukosa bukal atau swabbing lidah sendiri.Tanpa RNA virus yang cukup, RT-qPCR dapat mengembalikan hasil tes negatif palsu.Di Provinsi Hubei, China, sensitivitas RT-PCR dalam deteksi awal dilaporkan hanya sekitar 30%-50%, dengan rata-rata 40%.Tingginya tingkat negatif palsu kemungkinan besar disebabkan oleh pengambilan sampel yang tidak memadai.
Selain itu, tes RT-PCR membutuhkan personel yang sangat terlatih untuk melakukan langkah-langkah ekstraksi RNA yang kompleks dan prosedur amplifikasi PCR.Ini juga membutuhkan tingkat perlindungan biosafety yang lebih tinggi, fasilitas laboratorium khusus, dan instrumen PCR real-time.Di Cina, uji RT-PCR untuk deteksi COVID-19 perlu dilakukan di laboratorium biosafety level 2 (BSL-2), dengan perlindungan personel menggunakan praktik biosafety level 3 (BSL-3).Berdasarkan persyaratan tersebut, sejak awal Januari hingga awal Februari 2020, kapasitas laboratorium CDC Wuhan China hanya mampu mendeteksi beberapa ratus kasus per hari.Biasanya, ini tidak akan menjadi masalah saat menguji penyakit menular lainnya.Namun, ketika menghadapi pandemi global seperti COVID-19 dengan potensi jutaan orang untuk diuji, RT-PCR menjadi isu kritis karena persyaratannya untuk fasilitas laboratorium khusus atau peralatan teknis.Kelemahan ini dapat membatasi RT-PCR untuk digunakan sebagai alat yang efisien untuk skrining, dan juga dapat menyebabkan keterlambatan dalam laporan hasil pengujian.
Metode deteksi antibodi serologis
Dengan kemajuan perjalanan penyakit, terutama pada tahap pertengahan dan akhir, tingkat deteksi antibodi sangat tinggi.Sebuah penelitian di Rumah Sakit Pusat Selatan Wuhan menunjukkan bahwa tingkat deteksi antibodi bisa mencapai lebih dari 90% pada minggu ketiga infeksi COVID-19.Juga, antibodi adalah produk dari respons kekebalan manusia terhadap virus corona baru.Tes antibodi menawarkan beberapa keunggulan dibandingkan RT-PCR.Pertama, tes antibodi serologis sederhana dan cepat.Tes aliran lateral antibodi dapat digunakan di titik perawatan untuk memberikan hasil dalam 15 menit.Kedua, target yang terdeteksi oleh uji serologis adalah antibodi, yang diketahui jauh lebih stabil daripada RNA virus.Selama pengumpulan, pengangkutan, penyimpanan dan pengujian, spesimen untuk tes antibodi umumnya lebih stabil daripada spesimen untuk RT-PCR.Ketiga, karena antibodi terdistribusi secara merata dalam sirkulasi darah, variasi pengambilan sampel lebih sedikit dibandingkan dengan uji asam nukleat.Volume sampel yang diperlukan untuk tes antibodi relatif kecil.Misalnya, 10 mikroliter darah tusukan jari cukup untuk digunakan dalam tes aliran lateral antibodi.
Secara umum, tes antibodi dipilih sebagai alat pelengkap untuk deteksi asam nukleat untuk meningkatkan tingkat deteksi virus corona baru selama perjalanan penyakit.Ketika tes antibodi digunakan bersama dengan tes asam nukleat, tes ini dapat meningkatkan akurasi pengujian untuk diagnosis COVID19 dengan mengurangi potensi hasil positif palsu dan negatif palsu.Panduan pengoperasian saat ini tidak menyarankan penggunaan dua jenis pengujian secara terpisah sebagai format deteksi independen tetapi harus digunakan sebagai format gabungan.[2]
Gambar 2:Interpretasi yang benar dari asam nukleat dan hasil tes antibodi untuk mendeteksi infeksi virus corona baru
Gambar 3:Liming Bio-Products Co., Ltd. – Kit uji cepat ganda antibodi IgM/IgG novel coronavirus (StrongStep®Tes Cepat Antibodi IgM/IgG SARS-CoV-2, Imunokromatografi Lateks)
Gambar 4:Pengapuran Bio-Products Co., Ltd. – StrongStep®Novel Coronavirus (SARS-CoV-2) Multiplex Real-Time PCR kit (deteksi tiga gen, metode probe fluoresen).
Catatan:Kit PCR yang sangat sensitif dan siap pakai ini tersedia dalam format terliofilisasi (proses pengeringan beku) untuk penyimpanan jangka panjang.Kit dapat diangkut dan disimpan pada suhu kamar dan stabil selama satu tahun.Setiap tabung premix berisi semua reagen yang diperlukan untuk amplifikasi PCR, termasuk Reverse-transcriptase, Taq polimerase, primer, probe, dan substrat dNTPs. Pengguna cukup menyusun kembali campuran dengan menambahkan air tingkat PCR bersama dengan template dan kemudian memuat ke instrumen PCR untuk menjalankan amplifikasi.
Menanggapi wabah virus corona yang baru, Liming Bio-Products Co., Ltd. telah bekerja dengan cepat untuk mengembangkan dua kit diagnostik untuk memungkinkan laboratorium klinis dan kesehatan masyarakat mendiagnosis infeksi COVID-19 dengan cepat.Kit ini sangat cocok digunakan untuk skrining skala besar di negara dan wilayah di mana wabah virus corona baru menyebar dengan cepat, dan untuk memberikan diagnosis dan konfirmasi infeksi COVID-19.Kit ini hanya untuk digunakan di bawah Otorisasi Penggunaan Darurat Sebelumnya (PEUA).Pengujian terbatas pada laboratorium yang disertifikasi di bawah peraturan otoritas nasional atau lokal.
Metode deteksi antigen
1. Deteksi antigen virus diklasifikasikan dalam kategori deteksi langsung yang sama dengan deteksi asam nukleat.Metode deteksi langsung ini mencari bukti patogen virus dalam spesimen dan dapat digunakan untuk diagnosis konfirmasi.Namun, pengembangan alat pendeteksi antigen membutuhkan antibodi monoklonal berkualitas tinggi dengan afinitas kuat dan sensitivitas tinggi yang mampu mengenali dan menangkap virus patogen.Biasanya diperlukan waktu lebih dari enam bulan untuk memilih dan mengoptimalkan antibodi monoklonal yang cocok untuk digunakan dalam persiapan kit deteksi antigen.
2. Saat ini, reagen untuk deteksi langsung virus corona baru masih dalam tahap penelitian dan pengembangan.Oleh karena itu, tidak ada alat pendeteksi antigen yang telah divalidasi secara klinis dan tersedia secara komersial.Meskipun sebelumnya dilaporkan bahwa perusahaan diagnostik di Shenzhen telah mengembangkan kit deteksi antigen dan diuji secara klinis di Spanyol, keandalan dan akurasi pengujian tidak dapat divalidasi karena adanya masalah kualitas reagen.Sampai saat ini, NMPA (mantan FDA China) belum menyetujui kit deteksi antigen untuk penggunaan klinis.Kesimpulannya, berbagai metode deteksi telah dikembangkan.Setiap metode memiliki kelebihan dan keterbatasan.Hasil dari metode yang berbeda dapat digunakan untuk verifikasi dan pelengkap.
3. Menghasilkan test kit COVID-19 yang berkualitas sangat bergantung pada optimalisasi selama penelitian dan pengembangan.Pengapuran Bio-Produk Co, Ltd.kit uji diperlukan untuk memenuhi standar manufaktur dan kontrol kualitas yang ketat untuk memastikan bahwa mereka memberikan tingkat kinerja dan konsistensi tertinggi.Para ilmuwan di Liming Bio-Product Co., Ltd. memiliki pengalaman lebih dari dua puluh tahun dalam merancang, menguji, dan mengoptimalkan kit diagnostik in vitro untuk memastikan tingkat kinerja tertinggi dalam kuantifikasi analitis.
Selama Pandemi COVID-19, pemerintah China menghadapi lonjakan permintaan yang besar untuk bahan pencegahan epidemi di hotspot internasional.Pada tanggal 5 April, pada konferensi pers Mekanisme Pencegahan dan Pengendalian Bersama Dewan Negara "Memperkuat Manajemen Kualitas Bahan Medis dan Mengatur Tata Pasar", Jiang Fan, inspektur tingkat pertama dari Departemen Perdagangan Luar Negeri Kementerian of Commerce, mengatakan, “Selanjutnya, kami akan memfokuskan upaya kami pada dua aspek, pertama, untuk mempercepat dukungan lebih banyak pasokan medis yang dibutuhkan oleh masyarakat internasional, dan juga, untuk meningkatkan kontrol kualitas, regulasi, dan manajemen produk. Kami akan memberikan kontribusi China untuk bersama-sama menanggapi epidemi global dan membangun komunitas dengan masa depan bersama bagi umat manusia.
Gambar 5:Reagen coronavirus novel Liming Bio-Products Co., Ltd. telah memperoleh sertifikat pendaftaran EU CE
Sertifikat kehormatan
Houshenshan
Gambar 6. Liming Bio-Products Co., Ltd. mendukung Rumah Sakit Gunung Wuhan Vulcan(HouShenShan) untuk memerangi epidemi COVID-19 dan dianugerahi sertifikat kehormatan Palang Merah Wuhan.Rumah Sakit Gunung Vulcan Wuhan adalah rumah sakit paling terkenal di Tiongkok yang berspesialisasi dalam perawatan pasien COVID-19 yang parah.
Saat wabah virus corona baru terus menyebar ke seluruh dunia, Nanjing Liming Bio-Products Co., Ltd. meningkatkan dukungan dan membantu komunitas di seluruh dunia dengan teknologi inovatif kami untuk melawan ancaman global yang belum pernah terjadi sebelumnya ini.Pengujian cepat infeksi COVID-19 adalah bagian penting untuk mengatasi ancaman ini.Kami terus berkontribusi secara signifikan dengan menyediakan platform diagnostik berkualitas tinggi ke tangan petugas kesehatan garis depan sehingga orang dapat menerima hasil pengujian penting yang mereka butuhkan.Upaya Liming Bio-products Co., Ltd. dalam memerangi pandemi COVID-19 adalah dengan menyumbangkan teknologi, pengalaman, dan keahlian kami kepada komunitas internasional untuk pembangunan komunitas takdir global.
Tekan Lama~Pindai dan Ikuti Kami
Surel: sales@limingbio.com
Situs web: https://limingbio.com
Waktu posting: 01-Mei-2020
