Yang merupakan metode terbaik?
—Tes untuk Diagnosis Infeksi SARS-CoV-2
Untuk kasus COVID-19 yang dikonfirmasi, gejala klinis umum yang dilaporkan termasuk demam, batuk, mialgia, atau kelelahan.Namun gejala-gejala tersebut bukanlah ciri khas COVID-19 karena gejala-gejala ini mirip dengan penyakit yang terinfeksi virus lainnya seperti influenza.Saat ini, asam nukleat virus Real-Time PCR (rt-PCR), pencitraan CT dan beberapa parameter hematologi adalah alat utama untuk diagnosis klinis infeksi.Banyak alat uji laboratorium telah dikembangkan dan digunakan dalam pengujian spesimen pasien untuk COVID-19 oleh CDC Tiongkok1, CDC AS2dan perusahaan swasta lainnya.Tes antibodi IgG/IgM, metode uji serologis, juga telah ditambahkan sebagai kriteria diagnostik dalam pedoman diagnosis dan pengobatan versi terbaru China untuk penyakit virus corona baru (COVID-19), yang diterbitkan pada 3 Maret.1.Tes rt-PCR asam nukleat virus masih menjadi metode diagnostik standar saat ini untuk diagnosis COVID-19.
Langkah Kuat®Novel Coronavlrus (SARS-COV-2) Multiplex Real-Time PCR Kit (deteksi tiga gen)
Namun alat tes PCR waktu nyata ini, yang mencari materi genetik virus, misalnya di usap hidung, mulut, atau dubur, memiliki banyak keterbatasan:
1) Tes ini memiliki waktu penyelesaian yang lama dan rumit dalam pengoperasiannya;mereka umumnya mengambil rata-rata lebih dari 2 sampai 3 jam untuk menghasilkan hasil.
2) Tes PCR membutuhkan laboratorium bersertifikat, peralatan mahal dan teknisi terlatih untuk beroperasi.
3) Ada beberapa angka negatif palsu untuk rt-PCR COVID-19.Ini mungkin karena viral load SARS-CoV-2 yang rendah pada spesimen usap pernapasan bagian atas (Novel coronavirus terutama menginfeksi saluran pernapasan bagian bawah, seperti alveoli paru) dan tes tidak dapat mengidentifikasi orang yang mengalami infeksi, sembuh, dan membersihkan virus dari tubuh mereka.
Penelitian oleh Lirong Zou dkk4menemukan bahwa viral load yang lebih tinggi terdeteksi segera setelah timbulnya gejala, dengan viral load yang lebih tinggi terdeteksi di hidung daripada di tenggorokan dan pola pelepasan asam nukleat virus pada pasien yang terinfeksi SARS-CoV-2 mirip dengan pasien dengan influenza.4dan tampak berbeda dari yang terlihat pada pasien yang terinfeksi SARS-CoV-2.
Yang Pan dkk5memeriksa sampel serial (swab tenggorokan, dahak, urin, dan tinja) dari dua pasien di Beijing dan menemukan bahwa viral load pada sampel swab tenggorokan dan dahak memuncak sekitar 5–6 hari setelah timbulnya gejala, sampel dahak umumnya menunjukkan viral load yang lebih tinggi daripada sampel usap tenggorokan.Tidak ada RNA virus yang terdeteksi dalam sampel urin atau tinja dari kedua pasien ini.
Tes PCR hanya memberikan hasil positif ketika virus masih ada.Tes tidak dapat mengidentifikasi orang yang mengalami infeksi, pulih, dan membersihkan virus dari tubuh mereka.Sebenarnya, hanya sekitar 30% -50% yang positif untuk PCR pada pasien dengan pneumonia virus corona baru yang didiagnosis secara klinis.Banyak pasien pneumonia coronavirus baru tidak dapat didiagnosis karena tes asam nukleat negatif, sehingga mereka tidak bisa mendapatkan perawatan yang sesuai tepat waktu.Dari pedoman edisi pertama hingga keenam, hanya mengandalkan diagnosis hasil tes asam nukleat, yang menyebabkan masalah besar bagi dokter. "Peniup peluit" paling awal, Dr. Li Wenliang, dokter mata di Pusat Wuhan Rumah Sakit, sudah mati.Selama hidupnya, dia menjalani tiga tes asam nukleat dalam kasus demam dan batuk, dan terakhir kali dia mendapatkan hasil PCR positif.
Setelah diskusi oleh para ahli, diputuskan untuk meningkatkan metode pengujian serum sebagai kriteria diagnostik baru.Sedangkan tes antibodi, disebut juga tes serologis, yang dapat memastikan apakah seseorang terinfeksi bahkan setelah sistem kekebalannya telah membersihkan virus penyebab COVID-19.
Tes Cepat Antibodi StrongStep® SARS-COV-2 IgG/IgM
Tes antibodi IgG/IgM akan membantu melacak lebih banyak cara berbasis populasi yang telah terinfeksi, karena banyak kasus tampaknya menyebar dari pasien tanpa gejala yang tidak dapat diidentifikasi dengan mudah.Sepasang suami istri di Singapura, sang suami dinyatakan positif PCR, hasil tes PCR istrinya negatif, tetapi hasil tes antibodi menunjukkan bahwa ia memiliki antibodi, begitu pula suaminya.
Tes serologis perlu divalidasi dengan hati-hati untuk memastikan mereka bereaksi dengan andal, tetapi hanya untuk antibodi terhadap virus baru.Satu kekhawatiran adalah bahwa kesamaan antara virus yang menyebabkan sindrom pernapasan akut parah dan COVID-19 dapat menyebabkan reaktivitas silang.IgG-IgM yang dikembangkan oleh Xue Feng wang6dianggap dapat digunakan sebagai point-of-care test (POCT), karena dapat dilakukan di dekat tempat tidur dengan darah di jari.Kit tersebut memiliki sensitivitas 88,66% dan spesifisitas 90,63%.Namun, masih ada hasil positif palsu dan negatif palsu.
Dalam pedoman diagnosis dan pengobatan versi terbaru China untuk penyakit virus corona baru (COVID-19)1, kasus terkonfirmasi didefinisikan sebagai kasus suspek yang memenuhi salah satu kriteria berikut:
(1) Sampel saluran pernapasan, spesimen darah atau tinja yang diuji positif asam nukleat SARS-CoV-2 menggunakan rt-PCR;
(2) Urutan genetik virus dari sampel saluran pernapasan, darah atau sampel tinja sangat homolog dengan SARS-CoV-2 yang diketahui;
(3) Serum antibodi IgM spesifik virus corona dan antibodi IgG positif;
(4) Perubahan antibodi IgG spesifik virus novel serum dari negatif menjadi positif atau antibodi IgG spesifik virus corona selama masa pemulihan adalah 4 kali lebih tinggi daripada selama periode akut.
Diagnosis dan pengobatan COVID-19
| Pedoman | Diterbitkan | Kriteria diagnostik yang dikonfirmasi |
| Versi 7th | 3Mar.2020 | PCR NGS IgM+IgG |
| Versi 6th | 18 Februari 2020 | PCR NGS |
Referensi
1. Pedoman diagnosis dan pengobatan pneumonia virus corona baru (versi uji coba 7, Komisi Kesehatan Nasional Republik Rakyat Tiongkok, dikeluarkan pada 3.Mar.2020)
http://www.nhc.gov.cn/yzygj/s7652m/202003/a31191442e29474b98bfed5579d5af95.shtml
2. Penelitian Hanya Menggunakan Protokol RT-PCR Real-Time untuk Identifikasi 2019-nCoV
https://www.cdc.gov/coronavirus/2019-ncov/lab/rt-pcr-detection-instructions.html
3. Singapura mengklaim penggunaan pertama tes antibodi untuk melacak infeksi virus corona
https://www.sciencemag.org/news/2020/02/singapore-claims-first-use-antibody-test-track-coronavirus-infections
4. Viral Load SARS-CoV-2 pada Spesimen Saluran Pernapasan Atas Pasien Terinfeksi 19 Februari 2020 DOI: 10.1056/NEJMc2001737
5. Viralloads SARS-CoV-2 dalam sampel klinis Lancet Infect Dis 2020 Diterbitkan Online 24 Februari 2020 (https://doi.org/10.1016/S1473-3099(20)30113-4)
6. Pengembangan dan Aplikasi Klinis Tes Antibodi Gabungan IgM-IgG Cepat untuk SARS-CoV-2
Diagnosis Infeksi XueFeng Wang ORCID iD: 0000-0001-8854-275X
Waktu posting: 17-Mar-2020
